选择研究显微镜时要考虑的因素

什么是正确的研究显微镜?本文简要介绍了选择光学研究显微镜时所需的主要功能。

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光学显微镜通常是生命科学研究实验室中的中央设备之一。它可用于各种应用,揭示了许多科学问题。由此显微镜的配置和特征对于其应用覆盖范围至关重要,从荧光域通过荧光显微镜到活细胞成像。

本文简要概述了相关的显微镜功能,并在选择研究显微镜时应考虑的关键问题。

你用什么样的标本?

选择研究显微镜时的第一件事之一是您想要探索的样本类型。对于安装在薄玻璃载玻片上的固定样品,您可以使用直立显微镜。活细胞需要显微镜的特殊特征,因为它们保持在填充细胞培养基的相对大的细胞培养皿中。

只有一个倒置的结构,物镜在样品的下面,冷凝器在样品的上面,便于基本的自由空间和物镜与样品所需的接近。同时倒置显微镜可以很好地接近细胞,例如添加微操作器。

此外,活细胞需要足够的环境来生存。温度和CO.2注意力必须保持在一定的水平。一个人工气候室与相应的控制器是必要的,以完成这一任务。


你认为在哪个维度?

显微镜下的标本分成三个维度:长、宽、高。然而一些标本,如组织学切片,仅在xy方向成像,还有其他应用要求也在z维采集。为了成像三维体积,例如活细胞,一个机动目标左轮是可以引导你的样品通过焦点逐步通过。成像软件应该能够重建单个图像进行三维可视化。

对于活细胞,你必须增加维度时间。在本例中,以system为例稳定是另一个关键特征。由于成像系统在采集过程中会受到温度变化的影响,因此必须采取有效的对抗措施。自动调焦,如自适应聚焦控制(亚足联抵消这些热的影响,总是找到预定义的焦点。

哪种对比方法最适合你的样品?

大多数细胞 - 特别是动物细胞 - 用显微镜研究,没有足够的内在对比度看出细节。研究人员使用对比方法来解决这个问题。而相位对比(pH)和差动干扰对比迪拜国际资本)操纵穿过样本的光线以添加对比度,您也可以用它染色荧光染料免疫荧光)分别使用荧光蛋白

根据对比方法,显微镜需要特定的设备;相位对比需要特殊的目标然而迪拜国际资本利用某些棱镜必须切换到光路上。为了荧光显微镜你需要特殊的过滤器多维数据集允许正确的光波长度进出样品。

那么光源呢?

对比方法的选择也决定了光源的选择。透射光照明的传统亮场显微镜,相位对比和迪拜国际资本可以用卤素领导照明。荧光显微镜可以用LED照明或借助于,或汞金属卤化物灯。

您是否要记录或发布结果?

如果你想给你的标本拍照或做活细胞成像,你需要一台数码相机显微镜相机.特别是在荧光活细胞成像的情况下,建议使用灵敏的相机,以尽量减少激发光的量,这可能会损害细胞。除了有名无实CCDEMDDC摄像机,如今,SCMOS相机由于其高量子效率和采集速度而来。有关数字显微镜摄像头的更多信息,请阅读数字相机技术介绍。

此外,一个大的视野(FOV)有助于更快地找到有趣的区域,同时以更多的细胞进行图像。现代研究显微镜功能19毫米视场与19毫米sCMOS相机芯片完美匹配的摄像头端口。

通常,仅仅给你的标本拍照是不够的,还需要分析数据你获得的。为此目的易于使用成像分析软件有助于获得定量数据并进行实体数据分析。

你需要厚样品的(3D)信息吗?

厚的样品是显微镜的挑战。特别是宽视野显微镜当整个样本同时被照亮时,识别聚焦样本的特征会被聚焦区域发出的额外光线显著降低。

计算结算可以帮助获得无焦距光的图像。该技术既可以应用于单个图像平面上的即时结果(ICC:即时计算清除),也可以与额外的反卷积步骤(SVCC:小体积计算清除;LVCC:大容量计算清理),甚至更好的结果。反褶积将光子信息重新分配到它们的原点,从而使焦平面上所需结构的对比度更好。与传统的宽视场图像相比,这可以使用户更容易地从背景中区分感兴趣的结构。

你想在显微镜下操作你的细胞吗?

在过去的几年里,标本的照片处理变得很流行。这意味着研究人员不仅可以观察活细胞,还可以在光的帮助下操纵它们。光漂白后的荧光恢复(收紧)就是一个有助于理清动态细胞过程的例子。对于这些操作技术,通常需要额外的光源,这些光源必须集成到显微镜的光路中。

这种方法并不琐碎。Leica Infinity端口是一种通用解决方案,将额外的光源耦合到显微镜的光路,而不会扰乱图像质量。收紧,光切换,消融或光学机构。使用右侧适配器,研究人员甚至可以耦合他们的房屋设备。

你的预算是多少?

一个重要问题是您可以花多少钱。一些显微镜供应商提供适合特殊应用的预定义配置。但如果您不需要支付的所有预配置组件,该怎么办?这就是为什么自由配置比买一个预先定义好的显微镜系统更便宜。

此外,显微镜的要求可能随时间变化。在这种情况下,可升级系统具有某些优点。使用预定义和固定配置,您可以发现自己与有限的应用程序相关联。可升级性给你自由,让你随需求的变化而成长。

考虑到这些要点,a模块化显微镜平台,例如徕卡DMI8.,使研究人员能够开始一个负担得起的显微镜系统,可以在以后升级,并随他的需求增长。

谁将使用显微镜?

显微镜使用者的范围可能非常不均匀。特别是在大学里,用户可以是非常有经验的,也可以是绝对的初学者。因此,一个易于使用的显微镜系统运行直观的软件,例如徕卡应用套件X (拉斯维加斯X),帮助人们快速入门,快速获取数据。例如,面向工作流的设计、图像分析向导和外围设备的无缝集成简化了您的工作。

除了阔地研究显微镜之外,立体显微镜也经常用于生命科学研究实验室。请在文章中查找更多信息“选择立体显微镜时要考虑的因素".

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